生物化学实验  061M5037H

学期:2017—2018学年(春)第二学期 | 课程属性:实验课 | 任课教师:王瑞林
授课时间: 星期五, 第1、2、3、4、5、6、7、8节
授课地点: 学3-537(生命学院教学实验室)
授课周次: 3、4、5、6、7、8、9
授课时间: 星期六, 第1、2、3、4、5、6、7、8节
授课地点: 学3-537(生命学院教学实验室)
授课周次: 3、4、5、6、7、8、9
授课时间: 星期五, 第1、2、3、4、5、6、7、8节
授课地点: 学3-537(生命学院教学实验室)
授课周次: 3、4、5、6、7、8、9
授课时间: 星期六, 第1、2、3、4、5、6、7、8节
授课地点: 学3-537(生命学院教学实验室)
授课周次: 3、4、5、6、7、8、9
课程编号: 061M5037H 课时: 80 学分: 2.0
课程属性: 实验课 主讲教师:王瑞林
英文名称: Experiment of Biochemistry

教学目的、要求

本课程为生物化学与分子生物学专业研究生的专业课,也可作为相关专业研究生的选修课。
本课程为生命科学研究工作中涉及生物大分子分离、纯化和鉴定技术的各专业研究生在实验技术方面的基础课。本课程主要内容包括常用于生物大分子分制备过程中的提取、盐析、沉淀、层析、电泳、含量测定、酶活力测定等基本技术方法的实验原理与应用。
通过本课程学习,要求学生了解实验设计原理及实验技术的应用,经实践,掌握生物化学研究工作中应用广泛且重要的技术方法与实验技能,具备一定的独立解决问题的能力,以期能够为其顺利开展科研工作打下基础。

预修课程

生物化学

教 材

《生物化学实验技术讲义》,中国科学院研究生院讲义,2003。

主要内容

内容提要:
实验一 蛋白质含量测定
蛋白质含量测定的基本原理;实际工作中常用的测定方法-Folin酚法、紫外吸收法、蛋白质—染料结合法实验。
本实验采用方法:Folin酚法。

实验二 天花粉蛋白的分离纯化 
(一) 蛋白质的提取、盐析、沉淀、离心沉降技术和实验方法及仪器设备的操作技术。
(二) 离子交换柱层析实验原理、实验设计以及应用中的技术特点,离子交换剂的选择;柱层析分离纯化蛋白质的技术方法与实验。
实验三 亲和层析法纯化胰蛋白酶
(一) 亲和层析技术的原理与进展,应用过程中的技术要点;亲和吸附剂的制备和亲和层析分离纯化实验方法。
(二)酶活性测定的基础知识;结合有关研究工作的内容,学习掌握酶活性测定的实验设计与技术。

实验四 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质分子量 
电泳技术基本原理,电泳技术应用的基本特点;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量实验技术;

实验五 等电点聚焦测蛋白质等电点
等电点聚焦电泳测定蛋白质等电点实验技术。

实验六 GPI-专一性磷脂酶-D(GPI-PLD)活性测定 

参考文献

1. 张龙翔等,《生化实验方法和技术》(第二版),高等教育出版社,北京,1997。
2. 何忠效等,《现代生物技术概论》,北京师范大学出版社,北京,1999。
3. 王重庆等,《高等生物化学实验教程》,北京大学出版社,北京,1994。